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2×PAGE專用Taq PCR預混液(含染料)-核酸提取
更新時間:2025-01-03
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廠商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:
2×PAGE專用Taq PCR預混液(含染料)-核酸提取
1. 產(chǎn)品描述:
信勵致和®2×PAGE專用Taq PCR預混液(含染料)包含Taq DNA 聚合酶、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系,濃度為2×,使用時只需取適量 2×PAGE 專用 Taq PCR 預混液(含染料),加入模板和引物,并加入ddH2O 補足體積,使PCR Mix 溶液濃度為1×即可進行反應。適用于常規(guī)PCR及較短DNA片段的PCR擴增,專用于聚丙烯酰胺電泳檢測。
2. 產(chǎn)品特點:
(1)使用方便,僅需加?模板和引物即可進行PCR擴增。
(2)快速、高效,減少加樣步驟,節(jié)約時間,可有效降低污染和加樣錯誤風險。
(3)組分中包含染料,擴增產(chǎn)物可直接用于電泳檢測
2×PAGE專用Taq PCR預混液(含染料)-核酸提取
使用說明
1. 產(chǎn)品組分:
組分/含量 | AB0318 |
2×PAGE專用Taq PCR預混液(含染料) | 5×1 mL |
2. 儲運條件:
-25~-15 ℃保存12個月。干冰運輸。
3. 注意事項:
(1)試劑于冰上溶解。
(2)避免試劑反復凍融。
常見問題:
1. 擴增產(chǎn)物沒有或很少?
原因分析:模板濃度過低;實驗樣品DNA損傷或降解;PCR條件未優(yōu)化;退火溫度過高;延伸時間太短;循環(huán)次數(shù)太少;引物設(shè)計不完善;引物濃度過低;Mg2+濃度未優(yōu)化;模板質(zhì)量太差。
解決方案:建議DNA樣品不要反復凍融,以免造成DNA的損失;優(yōu)化PCR條件,對于基因片段較長的片段適當增加延伸時間,增加循環(huán)數(shù)。
2. 出現(xiàn)非特異性擴增?
原因分析:引起該現(xiàn)象的主要原因有引物濃度未優(yōu)化或者引物降解;退火溫度過低;引物特異性低;擴增循環(huán)數(shù)過多。
解決方案:建議將引物置于4℃或者-20℃保存;適當提高退火溫度;設(shè)計特異性高的引物;擴增循環(huán)數(shù)不宜超過35。
3. 陰性對照出現(xiàn)空白條帶?
原因分析:陰性對照出現(xiàn)條帶一般有三個較為常見的原因,分別是引物特異性較低、PCR體系存在污染、電泳時上樣量過多導致陰性對照的膠孔飄進去了樣品。
解決方案:重新設(shè)計高特異性引物,并BLAST檢測引物特異性;重新配置PCR反應體系;上樣時避免過多,手不要抖。
4. 電泳膠圖出現(xiàn)拖尾彌散?
原因分析:配置PCR體系時DNA聚合酶加入量過多,酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì),酶量較多會產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象;PCR產(chǎn)物降解。
解決方案:建議根據(jù)反應體系的大小及產(chǎn)品說明書加入適量的酶;建議在獲得PCR后的產(chǎn)物即可進行電泳,置于-20℃長期儲存,盡量不要在常溫放置。